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哈兽研研究环介导的等温扩增技术诊断猪繁殖与呼吸综合症
发布时间：
2016-06-27 12:37
作者：
哈兽研研究环介导的等温扩增技术诊断猪繁殖与呼吸综合症
个人简介
姓名：崔尚金
职称：副研究员
工作单位：哈尔滨兽医研究所
主要工作成果：先后有5项成果获得鉴定、获得中国农业科学院科学技术成果二等奖、哈尔滨市科技进步三等奖、黑龙江省科技进步三等奖、哈尔滨自然科学技术学术成果奖一等奖等奖项6项。向中华人名共和国国家版权局申报获得了“疾病防治数字化智能系统（B/S）V1.0”版权；申报了4项国家发明专利、其中1项已获得授权，3项进入实申阶段。在核心期刊等共发表文章117篇，其中SCI收录的9篇，7篇SCI研究论文是由本课题独立完成的，本人为第1作者和通讯作者。主编著10部，参编4部。
获奖成果简介
项目名称：猪繁殖与呼吸综合征新型诊断技术的研制
获得奖项：第六届“大北农科技奖”科技促进奖
项目简介： 猪繁殖与呼吸综合征病毒为动脉炎病毒科动脉炎病毒属成员。它是猪的一种重要传染性疾病病原，主要引起妊娠期母猪早产、流产，产死胎、弱胎、木乃伊胎，新生仔猪普遍发生肺炎、生长迟缓和死亡率增加。
胶体金免疫层析法为国际上90年代新发展的层析法与免疫胶体金技术相结合的诊断技术，用于检测PRRSV在国内尚未见报道。本研究进行了胶体金免疫层析法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒检测方法的建立和初步应用，应用胶体金试纸检测PRRSV感染不需要仪器的辅助，是现地急需的快速诊断试剂。本研究采用了快速、简便、易于操作的方法对我国PRRSV分离株M和NP基因插入原核表达载体pET32a的多克隆位点，构建了原核表达载体利用大肠杆菌进行融合表达，经优化表达参数发现表达产物主要存在于菌体裂解后的上清中。经亲和纯化后，对目的蛋白进行免疫检测，确定其有良好的免疫活性。利用纯化后的蛋白建立单抗，构建了检测PRRSV抗体和病毒的免疫胶体金试纸条。本研究不仅解决了全菌体抗原不散毒、敏感、特异的问题，而且表达的重组蛋白、单抗能够产业化和标准化生产。
环介导的等温扩增技术是日本学者Notomi 等于2000年发明的一种基于单链环状结构的核酸扩增技术。该方法可以在普通恒温水浴锅中反应1小时即可完成。由于环介导的等温扩增方法简单，高效并且具有较高的敏感性和特异性，它已经成功应于多种病原的检测。本研究运用环介导的等温扩增技术建立一种实用便捷的PRRSV检测方法，为PRRSV的早期快速诊断提供强有力的工具。
通过本项目的实施，必将会进一步丰富和完善我国PRRSV的检测手段，提高疫病防控能力，增强猪肉、猪场环境、进出口及相关产品的国际竞争力，彻底控制和消灭PRRSV在我国的流行与发生，为我国重大动物疫病的无病认证工作提供翔实的数据支持。本研究填补了我国在PRRSV快速检测方面的空白，具有很好的产业化开发前景和应用价值。
本文转载自农博网，原文地址：http://science.aweb.com.cn/2009/12/22/359200912221615140.html
