引物设计的思想方法第一阶段:检索适合引物设计的标靶领域，Primer Explorer等检索工具策二阶段:检索标靶领域最优化引物通过实验进行选择实时浊度测定仪阳性反应时间短，阴性反应时完全没有非特异性扩增或与阳性反应时间相比显著延迟。第三阶段:环引物的设计

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