引物设计的思想方法 第一阶段:检索适合引物设计的标靶领域,Primer Explorer等检索工具 策二阶段:检索标靶领域最优化引物 通过实验进行选择 实时浊度测定仪 阳性反应时间短, 阴性反应时完全没有非特异性扩增 或与阳性反应时间相比显著延迟。 第三阶段:环引物的设计