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引物设计 [ 2020-06-11 ]
引物设计的思想方法
第一阶段:检索适合引物设计的标靶领域,Primer Explorer等检索工具
策二阶段:检索标靶领域最优化引物 通过实验进行选择 实时浊度测定仪 阳性反应时间短, 阴性反应时完全没有非特异性扩增 或与阳性反应时间相比显著延迟。
第三阶段:环引物的设计
常见问题 [ 2017-06-25 ]
1.请具体介绍一下荣研公司环介导等温扩增试剂盒的情况?
2.环介导等温扩增引物如何设计及筛选?
3.环介导等温扩增扩增产物用什么方法检测比较好?
4.怎么能有效的控制污染?
5.如何解决实验室污染?
6.荣研公司的FDR荧光染料原理是什么?
7.环介导等温扩增产物可以做酶切鉴定吗?
8.为什么在实验室建立相关病原环介导等温扩增检测方法阶段需要使用实时浊度仪?
9.实时浊度仪上显示的扩增曲线到了最高峰为何会有往下降的趋势?
10.加环引物出现假阳性,不加就结果正常,什么原因?
环介导等温扩增法是“ Loop-Mediated Isothermal Amplification”的简称、是荣研化学独立研发的一种“简便、快速、准确、廉价”的基因扩增方法。 环介导等温扩增法的特征是针对目标DN链上的六个区段设计四个不同的引物然后再 利用链置换反应在一定温度下进行反应。反应只需要把基因模板、引物、链置换型DNMA 合成酶、基质等共同置于一定温度下(60~65℃)、经一个步骤即可完成。扩增效率极高,可在15分~1小时内实现109~100倍的扩增。而且由于有着高度的特异性,只需根据扩增反应产物的有无即可对靶基因序列的存在与否作出判断。
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